Chẩn đoán phân tử

Chẩn đoán phân tử là một gia đình các kỹ thuật để phân tích các dấu ấn sinh học trong bộ gen và proteome, và cách các tế bào của chúng biểu hiện gen của chúng là protein, áp dụng sinh học phân tử vào xét nghiệm y tế. Trong y học, công nghệ được sử dụng để chẩn đoán và theo dõi bệnh, phát hiện rủi ro và Quyết định liệu pháp nào hiệu quả nhất đối với một bệnh nhân cá nhân, giới thiệu về an toàn sinh học nông nghiệp, giống như theo dõi bệnh cây trồng và vật nuôi, ước tính rủi ro và quyết định những biện pháp phân lập nào phải được thực hiện.Bằng cách phân tích các chi tiết cụ thể của bệnh nhân và bệnh của họ, chẩn đoán phân tử đưa ra lời hứa về y học cá nhân. Các xét nghiệm này rất hữu ích trong một loạt các chuyên khoa y tế, bao gồm bệnh truyền nhiễm, ung thư, gõ kháng nguyên bạch cầu ở người (để nghiên cứu và dự đoán chức năng miễn dịch), đông máu, và dược động học Dự đoán di truyền về thuốc sẽ có hiệu quả nhất .: V -VII Chúng trùng lặp với hóa học lâm sàng (xét nghiệm y học thể chất).

Kỹ thuật

Phát triển từ các công cụ nghiên cứu

Việc công nghiệp hóa các xét nghiệm sinh học phân tử đã sử dụng trong phòng khám thực hành.Preface thu nhỏ vào một thiết bị cầm tay duy nhất có thể đưa chẩn đoán y tế vào phòng khám, văn phòng hoặc nhà. Phòng thí nghiệm lâm sàng giới thiệu yêu cầu tiêu chuẩn cao về độ tin cậy; Chẩn đoán có thể yêu cầu chứng nhận hoặc phải tuân theo các quy định về thiết bị y tế. Vào năm 2011, một số phòng thí nghiệm lâm sàng Hoa Kỳ vẫn sử dụng bộ dụng cụ xét nghiệm được bán cho "Chỉ sử dụng nghiên cứu. " Các quy trình trong phòng thí nghiệm cần tuân thủ các quy định như sửa đổi cải tiến phòng thí nghiệm lâm sàng, Đạo luật về trách nhiệm và trách nhiệm bảo hiểm y tế, thực hành phòng thí nghiệm tốt, và các quy định của Cơ quan Quản lý Thực phẩm và Dược phẩm tại Hoa Kỳ. Hệ thống quản lý thông tin bảo vệ bằng cách theo dõi các quy trình này. Quy định áp dụng cho nhân viên và vật tư. Tính đến năm 2012, 12 tiểu bang Hoa Kỳ yêu cầu các nhà nghiên cứu bệnh học phân tử phải được cấp phép; Một số hội đồng, bao gồm Hội đồng Di truyền Y khoa Hoa Kỳ và Hội đồng Bệnh học Hoa Kỳ, Chứng nhận Kỹ thuật viên, Giám sát viên và Giám đốc phòng thí nghiệm.

Tự động hóa và mã vạch mẫu tối đa hóa thông lượng và giảm khả năng gây ra lỗi hoặc ô nhiễm trong quá trình xử lý thủ công và báo cáo kết quả. Một thiết bị duy nhất thực hiện kiểm tra từ đầu đến cuối bây giờ là có thể.

Xét nghiệm

Chẩn đoán phân tử sử dụng sinh học in vitro như PCR-ELISA hoặc huỳnh quang trong lai tạo tại chỗ. Xét nghiệm phát hiện một phân tử (thường ở nồng độ thấp) là một dấu hiệu của bệnh hoặc nguy cơ trong một mẫu được lấy từ bệnh nhân. phê bình. Xử lý thủ công nên được giảm thiểu. Các phân tử RNA tạo ra một số thách thức nhất định. Nó cung cấp một thước đo biểu hiện gen như là một phần của quá trình tế bào biểu hiện gen dưới dạng protein, nhưng dễ bị thủy phân và phá vỡ bởi các enzyme RNase hiện tại. Các mẫu có thể được đóng băng trong nitơ lỏng hoặc được ủ trong chất bảo quản.Bởi vì các phương pháp chẩn đoán phân tử có thể phát hiện các dấu hiệu nhạy cảm, các xét nghiệm này ít xâm lấn hơn so với sinh thiết truyền thống. Ví dụ, một mẫu máu đơn giản là đủ để trích xuất thông tin di truyền từ các khối u, cấy ghép hoặc thai nhi do sự hiện diện của axit nucleic không có tế bào ở người Plasma.CH 45 Nhiều phương pháp chẩn đoán phân tử (nhưng không phải tất cả) dựa trên phát hiện axit nucleic bằng cách sử dụng phản ứng chuỗi polymerase (PCR) để tăng đáng kể số lượng phân tử axit nucleic, do đó khuếch đại trình tự mục tiêu trong mẫu bệnh nhân. Giới thiệu PCR là một phương pháp khuếch đại bằng cách sử dụng DNA mẫu để tổng hợp các đoạn mồi, DNA polymerase và DNTP. Để lai với mẫu và polymerase để mở rộng các đoạn mồi. Trình độ nhiệt độ tăng gấp đôi số lượng trình tự mục tiêu. Phép tắt các biến thể trình tự bằng cách sử dụng PCR thường liên quan đến thiết kế và sử dụng thuốc thử oligonucleotide khuếch đại sự quan tâm hơn Trình tự.pcr hiện là phương pháp phát hiện trình tự DNA được sử dụng rộng rãi nhất. Sự phân tách các điểm đánh dấu có thể sử dụng PCR thời gian thực, trình tự trực tiếp: CH 17 microarray-chip đúc sẵn kiểm tra nhiều điểm đánh dấu cùng một lúc, CH 24 hoặc MALDI-TOF. Nguyên tắc áp dụng trong proteome và bộ gen. Các mảng protein thông lượng cao có thể sử dụng liên hợp DNA hoặc kháng thể bổ sung, vì vậy nhiều protein khác nhau có thể được phát hiện song song áp dụng trong các phòng thí nghiệm nơi chúng được sử dụng. Do đó, cần xác nhận và sử dụng các biện pháp kiểm soát thích hợp theo yêu cầu theo quy định, đặc biệt nếu kết quả có thể được sử dụng để thông báo các quyết định điều trị của bệnh nhân.